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基础科研
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双青咽喉片抗炎、镇咳、祛痰及镇痛作用的实验研究
作者:    人气:4674    时间:2014-1-26 8:24:55

    作者:张红,刘明华,冯文宇,陈维刚,黄兴武,肖顺汉

  摘要 目的: 观察双青咽喉片抗炎、镇咳、祛痰及镇痛作用。 方法: 通过蛋清所致大鼠足趾肿胀实验、腹腔注射醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高实验、二甲苯诱发小鼠耳廓肿实验观察双青咽喉片的抗炎作用;通过浓氨水所致小鼠咳嗽实验和小鼠气管排泌酚红实验观察双青咽喉片的镇咳和祛痰作用;通过醋酸和热板刺激所致小鼠疼痛反应实验观察双青咽喉片的镇痛作用。 结果: 双青咽喉片能明显减轻蛋清引起的炎症反应,降低腹腔毛细血管通透性,显著降低二甲苯致小鼠耳廓的肿胀度,并能明显减少浓氨水引起小鼠的咳嗽次数,增加气管排泌酚红的作用,减少醋酸致小鼠的扭体次数,提高小鼠对热刺激的痛阈值。 结论: 双青咽喉片具有抗炎、镇咳、祛痰及镇痛作用。
  关键词 双青咽喉片;急慢性咽喉炎;抗炎;镇咳;镇痛
  咽喉炎是一种常见疾病,根据病程可分为急性和慢性两大类,祖国医学统称为“喉痹”。由于其病因不同,临床用药也不同。现代医学大多采用抗生素类和抗病毒药物治疗,但效果不佳,易反复发作,是由于常见致病微生物对抗生素药物产生耐药性之故,于是人们将目光转向中医药。 [1] 双青咽喉片是一种我院新开发的中药有效成分研制的制剂,由青蒿、金银花、青果等中药组成,具有清热滋阴、利咽生津等功效,临床用于治疗急慢性咽喉炎。本文就其治疗急慢性咽喉炎的药效作出如下研究。
  1 材料
  1.1 药物与试剂 双青咽喉片:由泸州医学院药研所提供,应用时配成液体剂型,每毫升含药物有效成分24mg(批号:050602);银黄含片:由成都地奥制药集团有限公司生产(批号:0412070);阿司匹林肠溶片:由西安博华制药有限责任公司生产(批号:0405024);复方甘草片:由西南药业股份有限公司生产(批号:050327);酚红:AR级,上海试剂三厂生产(批号:990706);醋酸:分析纯,成都石羊化学试剂厂生产(批号:20041225)。
  1.2 动物 Wistar种大鼠,140~160克,雄性;KM种小鼠,18~22克,雌雄各半,Ⅰ级合格动物,合格证号:川医动字第056,由泸州医学院动物科提供。
  1.3 仪器 722型分光光度计:上海精密科学仪器有限公司,型号SFZ1606013223;电子天平:沈阳龙腾电子称量仪器有限公司,型号ES1201-4。
  1.4 统计方法 由SPSS10.0软件完成。
  2 实验方法与结果
  2.1 抗炎实验 [2]
  2.1.1 双青咽喉片对蛋清所致大鼠足趾肿胀的影响健康大鼠随机分成六组,每组10只,分别灌胃给予阿司匹林0.1g?kg -1 、银黄含片2.6g?kg -1 、双青咽喉片(0.03g?kg -1 、0.06g?kg -1 、0.12g?kg -1 )及等容量的生理盐水,一天一次,连续七天,第八天给药1小时后同时测出其正常右后足跖容积。于大鼠右后足跖掌腱膜下注入鸡蛋清0.1ml/只,然后分别于1h、2h、3h、4h、5h、6h测定其右后足跖容积,计算出肿胀值(致炎前后容积之差)。结果见表1。
  表1 双青咽喉片对蛋清所致大鼠足趾肿胀的影响(略)
  与对照组比较*P<0.05,**P<0.01
  2.1.2 双青咽喉片对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 健康KM小鼠随机分成五组,每组10只,分别灌胃给予阿司匹林0.1g?kg -1 、双青咽喉片(0.03g?kg -1 、0.06g?kg -1 、0.12g?kg -1 )及等容量的生理盐水,一天一次,连续七天,第八天给药1小时后,从尾静脉注入0.5%伊文思兰0.1ml/10g,随即腹腔注射0.6%冰醋酸0.2ml/只,20分钟后处死,打开腹腔,用6ml生理盐水分数次洗涤腹腔,吸出洗涤液(若有出血应该弃之不用)合并加入NS.至10ml,3000rpm离心15分钟,取上清夜于590nm比色测定其OD值,并进行组间比较其显著性。结果见表2。
  表2 双青咽喉片对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响(略)
  与对照组比较*P<0.05
  2.1.3 双青咽喉片对二甲苯诱发小鼠耳廓肿的影响 小鼠分组及灌胃同2.1.2,第八天给药1小时后,于一侧耳廓正反两面均匀涂抹二甲苯0.1ml,15分钟后处死,沿耳廓基线剪下两耳,于同一部位用打孔器打下直径9mm耳片经用电子天平称重,以两耳片重量之差为肿胀度,并进行组间比较其显著性。结果见表3。
  表3 双青咽喉片对二甲苯诱发小鼠耳廓肿的影响(略)
  与对照组比较*P<0.05,**P<0.01
  2.2 双青咽喉片对浓氨水致小鼠咳嗽的影响 [3] 健康KM种小鼠随机分成五组,每组10只,分别灌胃给予甘草片0.25g?kg -1 、双青咽喉片(0.03g?kg -1 、0.06g?kg -1 、0.12g?kg -1 )及等容量的生理盐水,一天一次,连续七天,第八天灌胃给药1小时后将氨水棉球(1.0ml氨水/棉球)置钟罩内,保留1分钟后将小鼠从罩内取出,立即观察记录各鼠3分钟内咳嗽次数,并进行组间比较其显著性。结果见表4。
  表4 双青咽喉片对浓氨水致小鼠咳嗽的影响(略)
  与对照组比较**P<0.01
2.3 双青咽喉片对小鼠气管排泌酚红的影响 [3] 小鼠分组灌胃同2.2,第八天给药30分钟后,腹腔注射5%酚红0.1ml/10g, 30分钟处死小鼠,剥离气管周围组织,剪下自甲状腺软骨下至气管分支处的一段气管,放入盛有2mlNS的试管中,加入0.1ml(或12滴)氢氧化钠,用546nm的分光光度计测OD值,用酚红作一标准曲线,根据曲线计算酚红含量(μg/ml),与对照组比较。结果见表5。
  表5 双青咽喉片对小鼠气管排泌酚红的影响(略)
  与对照组比较**P<0.01
  2.4 镇痛实验 [3,4]
  2.4.1 双青咽喉片对醋酸致小鼠疼痛的影响 小鼠分组同2.1.2,分别灌胃给予阿司匹林0.1g?kg -1 、双青咽喉片(0.03g?kg -1 、0.06g?kg -1 、0.12g?kg -1 )及等容量的生理盐水,一天一次,连续七天,第八天给药30分钟后,腹腔注射0.5%醋酸0.2ml/只,立即观察记录各鼠15分钟内出现的扭体次数,并进行组间比较其显著性。结果见表6。
  表6 双青咽喉片对醋酸致小鼠疼痛的影响(略)
  与对照组比较**P<0.01
  2.4.2 双青咽喉片对小鼠热刺激致痛的影响 室温在15~20℃时,调节恒温水浴箱使水温恒定在55±0.5℃,放入800ml烧杯预热10分钟后,分别将健康KM种雌性小鼠放入烧杯中,并立即记录时间,小鼠自放在烧杯中至出现舔后足所需时间(秒)作为该鼠的痛阈值,凡舔后足时间小于5秒或大于30秒或跳跃者弃之不用,将合格的小鼠随机分为五组重复测定其正常阈值,取两次正常痛阈平均值作为该鼠给药前痛阈值,然后分别灌胃给予阿司匹林0.1g?kg -1 、双青咽喉片(0.03g?kg -1 、0.06g?kg -1 、0.12g?kg -1 )及等容量的生理盐水,一天一次,连续七天,第八天给药后15、30、60分钟分别测小鼠痛阈值,如60秒仍无反应,其痛阈以60秒计算,以痛阈提高值(给药后痛阈值减去给药前痛阈值),进行组间比较其显著性。结果见表7。
  表7 双青咽喉片对小鼠热刺激致痛的影响(略)
  与对照组比较*P<0.05,**P<0.01
  3 讨论
  咽喉炎患者有多种咽部不适,如干燥、灼热、隐痛发痒和异物感等 [5] ,目前,临床上治疗急慢性咽喉炎的复方中药制剂很多,而复方中药物搭配也多种多样。本方以金银花、青蒿、青果等为主,金银花是治疗咽炎的一味常用药,其性甘、寒,归肺、胃、大肠经,清热解毒作用很强并有疏散风热之力,主要用于外感风热型的急性咽炎,现代研究表明,金银花的有效成分为氯原酸和异氯原酸,具有广谱抗菌、抗病毒及消炎作用,能够抑制多种病菌的生长,并能解热及促进白细胞的吞噬功能 [6] ,慢性咽炎常常由细菌感染所致,因此,用金银花可起到较好的抑菌作用,对治疗咽炎有利;青蒿的有效成分青蒿素,在临床上常用于治疗疟疾,现有大量研究表明青蒿素对体液免疫有抑制作用,但对细胞免疫有促进作用,青蒿素对特异性细胞免疫功能的增强作用,主要能增强效应阶段Ts细胞的活性,Ts细胞是青蒿素效应靶细胞,青蒿素对单核细胞功能具有抑制作用,对红细胞免疫粘附功能也有促进作用 [7] ;青果可清热解毒、利咽生津,是治疗咽喉肿痛的有效中药。由此可知金银花、青蒿、青果具有显著的抗病毒、抗菌、解热、抗炎、抗过敏等作用,这三种药物在本方中起到了协同作用,而本方为纯中药制品,避免了使用抗生素的副作用及产生的耐药性,且药价低廉,使用方便,值得临床推广应用。
  通过本次实验研究发现,足趾肿胀实验、毛细血管通透性实验及耳廓肿实验提示双青咽喉片具有较明显的抗炎作用;而镇咳实验中双青咽喉片能明显减少浓氨水引起小鼠的咳嗽次数表明其具有显著的镇咳作用;祛痰实验中双青咽喉片可显著增加气管排泌酚红,表明它具有很好的祛痰作用;热板法和扭体法两项镇痛实验表明双青咽喉片具有镇痛作用。
  综上所述,实验研究证明双青咽喉片具有抗炎、镇咳、祛痰及镇痛作用,为其应用于临床治疗急慢性咽喉炎提供了科学的实验室依据,但其作用机制仍有待于进一步研究。

  参考文献
  1 周凌,刘彦臣.咽炎的中医论治及研究进展.中医药学报,1999;27(2)∶63~65
  2 陈奇主编.中药药理研究方法学.北京:人民卫生出版社,1996∶305~310
  3 徐叔云等主编.药理实验方法学(三版).北京:人民卫生出版社,2003;882、886、1359、1363
  4 卿晨,张雁丽.骨风丹抗炎镇痛作用的实验研究.昆明医学院学报,2004;25(2)∶35~39
  5 周灿禄,曾平.慢性咽炎的中药治疗.中华实用中西医杂志,2005;18(3)∶379~379
  6 徐和清,欧铃俐.自制利咽饮治疗慢性咽炎150例临床观察.中华临床医药杂志(广州),2003;(60)∶21~21
  7 蒋江红.青蒿琥酯的药理研究纂要.中医药学刊,2003;21(9)∶1502~1503

  (泸州医学院药理教研室,泸州 646000)
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